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技術文章

Technical articles

2014
9-16

ELISA法細胞凋亡檢測操作步驟
細胞凋亡的發生是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產生180bp～200bp或其倍數的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復合物而不被核酸內切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法，應用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體，與核小體片段形成夾心結構，可特異性檢測細胞溶解物中的核小體片段。常見樣本以及基本操作方法：1.收集細胞，離心后，用200µl溶細胞緩沖液重新懸浮，室溫下作用30min。（培養細胞的上清液、血漿和血清都可作為檢測樣...
2014
9-9

大鼠胰島素ELISA試劑盒相關介紹
胰島素是由胰島B細胞受內源性或外源性物質如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質激素。胰島素是機體內*降低血糖的激素，同時促進糖原、脂肪、蛋白質合成。大鼠胰島素ELISA試劑盒是一種酶聯免疫吸附技術，應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠胰島素（INS）水平。用純化的大鼠胰島素（INS）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胰島素（INS），再與HRP標記的胰島素（INS）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯...
2014
9-3

探討“ELISA實驗重復性不佳及出現白板、陽性對照不顯色”
（一）、重復性不佳可能原因及解決方法？1.樣品數量多少不一，加樣時間有長有短。重復某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近2.保溫時間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致。重復測定標本，操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性。3.加樣量不一致。樣本稀釋前應充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。。（二）出現白板，陽性對照不顯色可能原因及解決方法？1.顯色液變質更換新的顯色液2.洗滌液配置有誤請按說明書所示稀釋倍數配制。3.未加酶結合物而認為...
2014
9-1

在同一條件下做WB實驗為什么一張膜顯影，一張膜未顯影？
近期恒遠經常接到客戶的：同一條件下，除了測的指標不一樣，為什么有張膜顯影，有張未顯影？？？上海恒遠技術分析：在同一條件下，如果一張膜顯影，一張膜未顯影，可以逐一查找原因：1、你是否兩張膜上都設有陽性對照？如果有，一張膜有信號，一張沒信號，可能是操作過程中有問題（可能原因是（1）、你結合底物會不會有問題，即沒有充分結合好，或者結合時間太短，（2）、你要確定兩張膜都是用新的底物反應液，（3）、就是沒有信號的膜會不會壓片時間太短，如果使用儀器掃片就不存在這種問題，）所以原因比較多，...
2014
8-18

ELISA實驗加樣步驟不當可能會影響實驗結果及解決方法
ELISA實驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床跟科研得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節操作不當可能會對實驗的檢測結果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。現我公司技術人員將加樣操作中常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以便給同行帶來一些啟發，提高試驗質量：加樣可能原因：1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣；2)手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)；3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。解決辦法：1)標本為血清：將血液...
2014
8-14

上海恒遠為您講解：PCR過程Z常見的三種檢測模式
定量PCR（PolymeraseChainReaction）技術有廣義概念和狹義概念。廣義概念的定量PCR技術是指以外參或內參為標準，通過對PCR終產物的分析或PCR過程的監測，進行PCR起始模板量的定量。狹義概念的定量PCR技術（嚴格意義的定量PCR技術）是指用外標法（熒光雜交探針保證特異性）通過監測PCR過程（監測擴增效率）達到定量起始模板數的目的，同時以內對照有效排除假陰性結果（擴增效率為零）。PCR過程的監測有多種檢測模式。zui常用的有三種檢測模式：⑴SYBRGre...
2014
8-7

上海恒遠公司ELISA試劑盒檢測方法
上海恒遠生物科技有限公司總部設在上海，公司專業經營生命科學領域的研究試劑、實驗室消耗品、ELISA試劑盒等，我們致力于向國內外生命科學研究人員提供*的產品和技術服務。首先讓我司的王總來談一下市場。首先R&D和TSZ等一些的ELISA試劑盒還是很值得信賴的，也得到了市場的認可，特別是R&D的盒子，我們賣的很好，就是價格好貴，經費不是很充裕的實驗室難消費的起。國內的廠家，質量在靈敏度上和R&D的盒子還是有很大差距，但是有一點是可以肯定的，盒子反映的結果是公正客觀的。還有一個缺點就...
2014
7-30

恒遠為您講解人P選擇素ELISA試劑盒操作中常見的問題及解答
人P選擇素ELISA試劑盒操作過程中常見的問題:1．溫育?溫育是ELISA測定中影響測定成敗zui為關鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定，抗原抗體的結合反應在固相上進行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結合，必須在一定的溫度條件下反應一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比，即溫度越高，則所需時間相對較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改變說明書操作，使用自己喜歡的溫育時間和溫育溫度，這樣造成一些不必要的麻...

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