技術(shù)文章
Technical articles
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恒遠告訴您前列腺素A的作用是什么
前列腺素a是什么,它對人體又有什么作用呢?讓恒遠公司的吳來告訴大家。前列腺素(prostaglandin,PG)存在于動物和人體中的一類不飽和脂肪酸組成的具有多種生理作用的活性物質(zhì)。zui早發(fā)現(xiàn)存在于人的精液中,當時以為這一物質(zhì)是由前列腺釋放的,因而定名為前列腺素。現(xiàn)已證明精液中的前列腺素主要來自精囊,除之全身許多組織細胞都能產(chǎn)生前列腺素。前列腺素(PG)在體內(nèi)由花生四烯酸所合成,結(jié)構(gòu)為一個環(huán)和兩條側(cè)鏈構(gòu)成的20碳不飽和脂肪酸。按其結(jié)構(gòu),前列腺素分為A、B、C、D、E、F、G...
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人血漿中緩激肽的MS定量檢測方法
緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽,由蛋白質(zhì)的激肽基團衍生而來。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動的效應(yīng)因子。它是血壓、腎功能和心臟功能的重要調(diào)節(jié)因子,還參與炎癥反應(yīng)。緩激肽可引起血管擴張,從而導致血壓降低。因此,對這種激素肽的變化進行高靈敏度、高選擇性和高準確度地定量,并將其作為疾病進展或藥物治療的評估指標,將會極為有利。盡管以往都是通過配體結(jié)合試驗(LBAs)對生物制劑進行定量分析,但在過去幾年中利用LC-MS/MS分析大分子已...
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核酸分離與純化的原則
材料與方法的選擇(一)材料與方法的選擇臨床常見的標本有血液,尿液,唾液,組織及培養(yǎng)細胞等;核酸分離與純化的方法非常多,如何恰當?shù)厥占c準備材料,選擇適宜的分離與純化方法是一個首要的問題。首先我們應(yīng)當明確核酸的分離與純化并不是zui終的目的,不同的實驗研究與應(yīng)用對核酸的產(chǎn)量,完整性,純度和濃度可能有不同的要求;至于分離與純化核酸所需的時間與成本也往往需要考慮;在不影響核酸質(zhì)量的情況下,應(yīng)選擇安全無毒的試劑與方案。近年來,有關(guān)試劑盒的開發(fā)與自動化儀器的使用,能批量制備核酸樣品,大...
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細胞凋亡的實驗原理
細胞凋亡的實驗原理細胞膜是一選擇性的生物膜,一般的生物染料如PI等不能穿過質(zhì)膜。當細胞壞死時,質(zhì)膜不完整,PI就進入細胞內(nèi)部,它可嵌入到DNA或RNA中,使壞死細胞著色,凋亡細胞和活細胞不著色。而一些活細胞染料由于為親脂性物質(zhì),可跨膜進入活細胞,因而可進行活細胞染色。Hoechst33342是一種活性熒光染料且毒性較弱,它是雙苯并咪唑的一種衍生物。與DNA特異結(jié)合(主要結(jié)合于A-T)堿基區(qū)),顯示凋亡細胞和活細胞。凡是看到有凋亡小體的細胞都是凋亡細胞。細胞死亡根據(jù)其性質(zhì)、起源...
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動物檢驗檢疫中定量的核酸檢測技術(shù)
在動物檢驗檢疫中核酸檢測技術(shù)大多數(shù)無需要求定量,所以在這只作簡單介紹。核酸檢測的定量化在人醫(yī)臨床和動物疫病基礎(chǔ)研究中應(yīng)用較多,可用于病情評估、療效預測和觀察及預后判斷、疫病的病理分析,具有一定的應(yīng)用價值。核酸的定量檢測一般有以下兩種方法。(1)定量的核酸雜交技術(shù)此類技術(shù)以分支鏈DNA信號放大技術(shù)(branchedDNAsignalamplificationassay,bDNA)為典型代表,bDNA技術(shù)系美國Chiron公司的,屬于一種改良的核酸雜交技術(shù),它定量的基本原理是樣品...
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上海恒遠告知:抗磷脂抗體檢測方法
檢測APLAzui敏感試驗是1983年介紹的ACLA的檢測,后來這種方法得到不斷改進,血清、血漿均可用于分析。該方法即為酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA):用純心磷脂的無水乙醇溶液(50/11)包被聚苯乙烯反應(yīng)板,常規(guī)方法洗滌后,用10%的BSA封閉;加l:50稀釋的待測血清,37~C孵育30rain;洗板后,再分別加入HRP標記的抗人γ(1:1500)、抗α(1:1000)、抗μ(1;8000)鏈的F(ab)2片段,37℃30min然后,OPD顯色,加終止液。492nm波長測吸...
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ELISA常用結(jié)果判定的方法
1.定性測定(1)陽性判定值法(cut-offvalue,CO值):一般為陰性對照的平均A值加一個常數(shù),試劑制備嚴格標準化,要先計算出陽性對照A值平均數(shù)和陰性對照A值平均數(shù)。標本A值≥CO值即為陽性。(2)抑制率法:在競爭抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。抑制率(%)=(A陰性對照A-A待測)/陰性對照X100%,一般以抑制率≥50%為陽性2。半定量測定結(jié)果一般以滴度表示。將標本連續(xù)稀釋后,進行ELISA檢測,在陽性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標本的“滴度”。3。定量測定即用己...
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酶標儀使用注意事項
1、工作環(huán)境酶標儀是一種精密的光學儀器,因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準確性和穩(wěn)定性,還能夠延長其使用壽命。A.儀器應(yīng)放置在無強磁場和干擾電壓的位置。B.儀器應(yīng)放置在噪音低于40分貝的環(huán)境下。C.為延緩光學部件的老化,應(yīng)避免陽光直射。D.操作環(huán)境溫度應(yīng)在15°C~40°C之間,環(huán)境濕度在15%~85%之間。E.操作時電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。F.操作環(huán)境空氣清潔,避免水汽、煙塵。G.保持干燥、干凈、水平的工作臺面,以及足夠的操作空間。2、操作注意事項許多醫(yī)院在使用酶標儀之前是通過目測判...
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