四虎成人精品无码永久在线丨亚洲色大成网站www永久网站丨人妻中文字幕无码专区丨激情综合色五月丁香六月欧美丨中文字字幕在线成人av电影

歡迎訪問上海恒遠生物科技有限公司網站

當前位置:主頁 > 技術文章 > ELISA常見樣本的處理方法—細胞樣本

技術文章

Technical articles
ELISA常見樣本的處理方法—細胞樣本
更新時間:2021-03-17 點擊次數:1393
ELISA(酶聯免疫吸附劑測定)是一種快速、靈敏、準確可靠的一種定量分析方法,樣本的處理對于ELISA實驗的成功有著舉足輕重的作用。 利用ELISA進行檢測的樣本類型包括常見的血液(血清、血漿),組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養上清以及不常見的皮膚組織、尿液、糞便、肺泡灌洗液、唾液、腦脊液、胸腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、處理方法和保存都會影響到ELISA實驗的結果。下面就常見ELISA細胞處理方法的整理,希望對您有所幫助。


細胞樣本根據目的物所在部位可選擇細胞裂解液或細胞培養上清作為樣本。 需要注意的是: 因該類樣本干擾因素較多, 如細胞狀態、 細胞數量(大于 10^6)、ph(約為 7)、培養基鹽離子濃度、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。


如果目的物是分泌型,主要在胞外,即可選擇細胞培養上清作為樣本,如果目的物主要存在于胞內,則建議選擇細胞裂解液作為樣本類型。細胞培養上清處理方法相對簡單,取細胞培養上清,1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可檢測。


細胞裂解液:

1)貼壁細胞需要先用胰酶消化,離心收集細胞(懸浮細胞可直接離心收集) ;

2)將收集到的細胞用冷PBS 洗3次;

3)物理方法裂解細胞(可先超聲破碎細胞,再反復凍融) :

       ⇒ 超聲破碎:取適量PBS 重懸細胞,用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂;

       ⇒ 反復凍融:將待破碎的細胞在-20 度以下冰凍,室溫融解,反復3次,使細胞溶脹破碎;

4)將標本于2-8 度 1500×g 離心 10 分鐘,收集上清備用。


一般情況下,物理方法如反復凍融,勻漿等方法會比化學方法好,因為化學方法會引入酸或堿,可能會對ELISA實驗產生影響。我們也做了相關實驗來評測化學提取液和洗滌劑對ELISA檢測的影響,如 RIPA、TritonX-100、NP-40和SDS、脫氧膽酸鈉、β巰基乙醇、DTT 和尿素。根據我們的質檢結果,高濃度的洗滌劑會影響ELISA檢測的終結果。然而,其效果會洗滌劑濃度的降低而減少。與其他化學裂解緩沖液相比,1%的 Triton X-100 和 1%NP-40 對 ELISA檢測的影響較小。如果一定要用化學提取方法的話,推薦用這兩種洗滌劑來提取靶蛋白。利用化學的細胞裂解液裂解細胞,如果去污劑成分會干擾抗原抗體反應影響檢測效果,推薦利用透析和超濾的方法除去去污劑成分。


處理樣本的過程就是收集目標蛋白的過程,由于蛋白容易變性,降解,故該過程應盡量溫和。樣本處理之后的儲存也非常重要,尤其注意不要反復凍融,樣本處理之后可分裝密封保存, 4 度保存應小于 1 周,-20 度不應超過 1 個月,-80度不應超過2個月。在標本使用前應緩慢均衡至室溫,不應加熱使之融解。樣本的處理是實驗成功yi 步, ,以上就是關于常見樣本處理方法的一個簡述,供研究者參考。

 
 
ELISA常見樣本的處理方法—細胞樣本

 

版權所有 © 上海恒遠生物科技有限公司 備案號:滬ICP備11004148號-3 技術支持:化工儀器網 管理登陸 sitemap.xml

在線客服 聯系方式

服務熱線

13564766906

19821325306

掃一掃,添加微信

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
主站蜘蛛池模板: 国产欧美va欧美va香蕉在线观看 | 国产精品人妻一区二区三区四| 毛茸茸性xxxx毛茸茸毛茸茸| 久久五十路丰满熟女中出 | 97丨九色丨国产人妻熟女| 无码av大香线蕉伊人久久| av在线亚洲男人的天堂| 四川少妇被弄到高潮| 国产午夜a理论毛片| 国产一国产aa毛片| 中文字幕人妻中文av不卡专区| 揉捏奶头高潮呻吟视频| 久久亚洲中文无码咪咪爱| 在线日韩av免费永久观看 | 国产成人欧美综合在线影院| 亚洲色无码国产精品网站可下载| 色综合久久中文字幕有码| 欧美性猛交xxxx黑人猛交| 乱码av麻豆丝袜熟女系列| 欧美老妇bbbwwbbbww| 性按摩无码中文| 日韩av午夜在线观看| 色资源av中文无码先锋| 亚洲欧美综合精品成人导航| 国产三级a三级三级| 亚洲欧美中文日韩在线v日本 | 在线观看免费人成视频网| 国产精品久久久久久不卡盗摄 | 2020久久香蕉国产线看观看| 亚洲国产精品一区二区第四页| 国内精品一区二区三区不卡| 中文字幕人成无码人妻综合社区 | 无遮挡又黄又刺激的视频| 性无码专区无码片| 日本一丰满一bbw| 性欧美vr高清极品| 亚洲精品国产成人99久久6| 国内免费视频成人精品| 色天使久久综合网天天| 日本高清视频网站www| 乱无码伦视频在线观看|